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采用化学标记和MALDI MSn质谱分析法进行多糖结构分析

阅读:709      发布时间:2018-1-5
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 摘要

  背景:

  人体中,多糖在糖蛋白的功能中起着重要作用。目前,由于多糖分析程序消耗时间和劳动,详细的结构分析非常具有挑战性,通常涉及多步骤序列处理、HPLC或电泳提纯、以及质谱分析。

  方法:

  在此项研究中,采用了一台AXIMA-Resonance?仪器来生成MALDI-IT-TOF- 谱图,以便在无需多步骤分离或酶处理条件下进行多糖序列分析。我们采用了质谱分析法来监控多糖的氧化。

  结果:

  数据表明,温和的氧化条件可特异性氧化唾液酸。结合碳水化合物氧化反应和分析结果,我们能够监控唾液酸化的氧化反应和寡糖的连接。

  1.方法和结果

1. 多糖氧化示意图

2. 多糖和糖蛋白高度特异性分析的质谱分析法示意图

  表1. 四种寡糖G1-G4及其氧化产物的质荷比。

  MS谱图显示了不同氧化条件下的反应产物。

  采用检测来监控氧化反应条件

 3. MS谱图显示了不同氧化条件下的反应产物

片段峰的扩大

4. 采用MS识别13371339的多糖结构

5采用MSn氧化聚糖检测技术识别的聚糖和氧化产物结构列表

  总结

  温和氧化条件能够特异性氧化碳水化合物链末端的唾液酸基团。因此,可以测定唾液酸化的多糖。

  分析能够在无需标记和糖苷酶处理条件下检测多糖构成和序列信息。

  数据能够指明氧化位点以及多糖的连接。

  参考文献

  Zhang H, Li XJ, Martin DB, Aebersold R.Nat Biotechnol.2003, 21(6), 660-666.

  Tian Y, Zhou Y, Elliott S, Aebersold R, Zhang H. Nat Protoc.2007, 2(2), 334-339.

  Van Lenten L. and Ashwell.J. G. Biol.Chem.1971, 246, 1889–1894

  关于岛津

  岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。

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