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分子荧光光谱仪的分析方法

2020年01月15日 10:41

　　【仪器网使用手册】分子荧光光谱仪可以进行样品的定性分析与定量分析。目前，荧光分析多数用于荧光物质的定量分析。常用的定量方法有工作曲线法、直接比较法和内标法。

　　分析方法

　　(1)定性方法：

　　不同分子结构的各种荧光物质，具有不同的激发光谱(吸收光谱)和荧光光谱，这是分子荧光分析的定性依据。

　　在一定实验条件下，用荧光分光光度计作试样和标样的激发光谱和荧光光谱，然后比较它们的光谱图，即可鉴定试样物质。

　　(2)定量方法：

　　1.工作曲线法

　　先配一系列不同浓度的标准溶液并分别测定其荧光值，然后将减去试剂空白荧光值的标准溶液荧光值与其相应浓度作图，即其工作曲线。

　　根据试液及试液空白荧光值，在此曲线上即可找到试液的浓度。同时根据工作曲线的线性情况，可确定试液的浓度范围上限。

　　2.直接比较法

　　试样和标样溶液的浓度比=(试样荧光值-试样本底荧光值)/(标样荧光值-标样本底荧光值)

　　直接比较法简单快速，它要求被测样品浓度与其相应的荧光值必须处于线性范围内。

　　3.内标法

　　试样和标样溶液的浓度比=(试样荧光值-试样本底荧光值)/(试样加标样的混合溶液荧光值-试样荧光值)

　　用内标法时，由于试样和标样的荧光值是在相同体系中测定的，因此可消除试样中某些杂质荧光的干扰。

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