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甲苯胺蓝染色液（0.5%,硼酸盐法）使用说明书

关键词: 甲苯胺蓝染色液
资料类型: doc
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上传时间: 2019年01月14日 11:57
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上传人: 上海古朵生物科技有限公司
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资料简介

　　甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法) 用于细胞核染色、肥大细胞染色，规格为100ml，属细胞染色液类，有效期12个月.

　　【信息说明】

　　产品名称：甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)

　　供应商：远慕染色液厂家

　　规格：100ml

　　分类：细胞染色

　　储存条件：室温,避光,12个月

　　用途：细胞核染色、肥大细胞染色

　　注意事项：硼酸盐溶液配制,甲苯胺蓝中的阳离子与组织细胞的酸性物质结合而被染色。染色结果为：细胞核呈蓝色,而肥大细胞胞质内含有肝素等异色性物质呈异染性紫红色。

　　【染色原理】

　　1、甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色；甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。

　　2、甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。

　　3、甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类；帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。

　　4、肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。

　　【注意事项】

　　1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。

　　2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

　　3、请严格按照甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)说明书上的要求进行规范化操作。

　　4、如果本品没有使用完，请遵循染色液相关保存方法进行完善保存。

　　【操作步骤】

　　甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)属细胞染色液类产品，其他操作步骤主要有以下四点进行：

　　肥大细胞染色

　　脱蜡至蒸馏水。

　　根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。

　　蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。

　　4、冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。

　　快速和无水乙醇脱水。

　　6、二甲苯透明，封固。

　　染色结果：肥大细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。

　　B、软骨染色

　　1、石蜡切片入二甲苯。

　　2、系列乙醇各。

　　3、自来水洗。

　　4、入Toluidine Blue O Stain，浸染。

　　5、自来水洗，滤纸吸干水分。

　　6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。

　　7、逐级乙醇脱水。

　　8、二甲苯透明，中性树胶封固。

　　染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。

　　C、细胞涂片染色

　　1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。

　　2、细胞涂片后，立即放入乙醇中固定，取出放在纸巾上。

　　3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。

　　4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。

　　5、无需干燥，直接镜检。

　　染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。

　　D、原位杂交染色

　　1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:100。

　　2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。

　　3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。

　　4、按需求进行压片固定。

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